几种常用的蛋白标签的功能和优点,如何检测蛋白是否泛素化？

1、几种常用的蛋白标签的功能和优点

重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。上周小知了给大家简单介绍了大肠杆菌原核表达的整体思路，这里给大家简要介绍几个常用的蛋白标签及其功能和优点。 GST(谷胱甘肽巯基转移酶) 标签蛋白本身是1个在解毒过程中起到重要作用的转移酶，它的天然大小为26KD。将它应用在原核表达的原因大致有两个，1是因为它是1个高度可溶的蛋白，希望可以利用它增加外源蛋白的可溶性；另1个是它可以在大肠杆菌中大量表达，起到提高表达量的作用。 GST融合表达系统广泛应用于各种融合蛋白的表达，可以在大肠杆。

2、如何检测蛋白是否泛素化？

方法1：western blot and strip\x0d\x0a通过WB检测所有发生泛素化的蛋白条带，拍照后，将膜strip。然后与特定蛋白的抗体和特定泛素化位点的抗体反应，显色拍照。通过阳性条带的对比来初步判断某1特定蛋白的特定位点发生了泛素化\x0d\x0a\x0d\x0a方法2：western blot and immunoprecipitations \x0d\x0a通过免疫共沉淀方法将某1特定蛋白以及与其结合的蛋白分离出来。分离出来的蛋白再进行SDS电泳和western blot分析。这1方法可以明确具体哪个蛋白的哪个赖氨酸残基发生了泛素化修饰。\x0d\x0a\x0d\x0a方法3：in vitro ubiquitination ass。

3、蛋白质融合标签

蛋白标签（Protein tag）技术是指利用基因克隆手段，将具有特定功能的多肽，蛋白质结构域，甚至完整蛋白质与目标蛋白融合在1起，以实现目标蛋白的表达纯化，检测和示踪等应用的技术。蛋白标签融合已经成为蛋白质研究中最常用的技术之1，下面我就为大家盘1盘这些常用标签的特点及应用。 蛋白标签根据其功能，大致可以分为检测标签、表达纯化标签和示踪标签3类。 蛋白质的检测方法包括质谱、酶活检测、免疫分析等，其中应用最为广泛的是免疫分析，常用的方法有：WB（Western Blot）、ELISA（Enzyme Linked Immunosorbent Assay）、IP（。

4、求大神翻译。细胞生物学

The structure of a vps27 tandem UIM construct has been determined in complex with ubiquitin by NMR. 通过核磁共振，在与泛素合成的复合物（或：络合物）中业已明确Vps27抗体串联泛素蛋白相互作用基序（UIM）的结构。 其中，UIM=ubiquitin-interacting-motif，泛素蛋白相互作用基序 供参。