请问"人巨噬细胞系U937"和分离PBMC诱导的巨噬细胞有什么异同?"人巨噬细胞系U937"到底是什么?人单核细胞白血病(THP-1)细胞培养攻略
1、请问"人巨噬细胞系U937"和分离PBMC诱导的巨噬细胞有什么异同?"人巨噬细胞系U937"到底是什么?
937那是细胞系,而诱导的那是原代,。
2、人单核细胞白血病(THP-1)细胞培养攻略
THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自1位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之1。 THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA型为:A2,A9,B5,DRw1,DRw2。 | 细胞复苏 1. 预热水浴锅至37℃ 2. 准备1个15mL离心管,加入2-3mL左右完全培养基待用 3. 将细胞从-80℃冰箱或液氮中取出后,放进1次性PE手套中,立即投入水浴锅,迅速用力摇晃管子,使其1分钟内融化 4. 酒精擦拭冻存管,进入生物安全柜,把融化的细胞悬液缓慢滴加到步骤2准备好的离心管中 5. 1200rpm(约250g)离心3分钟 6. 同时准备1个新的T25培养瓶,加入5mL完全培养基 7. 去上清,新鲜培养基重悬细胞后滴加到步骤6的培养瓶里,放入培养箱 小贴士:THP-1细胞复苏后通常需要3-5天恢复状态,建议复苏后48小时内不要进行操作。 | 细胞冻存 1. 预先配制好冻存液 【推荐海星 HyCyte™1步冻存液 (即用型、无血清、无需程序降温)】 2. 细胞1200rpm(约250g)3分钟离心后 3. 去上清,用配好的冻存液重悬细胞 4. 转移入冻存管 5. 冻存管放进程序冻存盒 6. 冻存盒放进-80度冰箱过夜,再放液氮长期保存 小贴士:由于THP-1是悬浮细胞,更易受到冻存影响,建议加大冻存密度,大约200万-300万/mL为宜,以提高复苏存活率。 | 培养条件 培养基:RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S 推荐传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液1次 培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃ | 传代操作 当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。 去掉培养皿中的培养基,加入PBS进行冲洗,并去上清; 加入胰酶进行润洗,并去上清; 放入CO2培养箱消化2-4min; 加入完全培养基终止消化,并吹打均匀。 | 常见问题 1. 收货时细胞出现伪足,或是碎片较多怎么办? 受到运输影响,悬浮细胞会短暂性出现形态改变的现象,如伪足等。通过传代培养,1周左右可以恢复正常。1些细胞在运输途中死亡而产生碎片,通过传代离心可以去除(见上文传代篇)。 2. 培养过程中细胞发生贴壁怎么办? 少量细胞贴壁属于正常情况,将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,需排查培养箱设置、培养基成分,以及培养器皿是否异常。 3. 培养过程中细胞发生聚团怎么办? 少量细胞聚团,呈葡萄串状,属于正常现象,特别是细胞密度较低时,易出现这种情况。更换血清品牌或增大血清比例(不超过20%)有助于解决聚团问题。不建议将聚团的细胞吹散,等待密度高时,会自己分散开。 4. 培养基里1定要加β-巯基乙醇吗? β-巯基乙醇是1种常用的培养补充剂,有抗氧化的作用,可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时,可适当增加巯基乙醇的比例(不超过标准量的1.5倍)。 5. 镜下观察时,难以聚焦或估算密度怎么办? 悬浮细胞会随着液体流动,不容易聚焦,静置5-10分钟使细胞沉底,之后在轻轻放上显微镜观察,将有助于聚焦和估算细胞密度。 | 注意事项 1. 细胞养不好,可能的原因有,THP-1细胞特别依赖细胞浓度,ATCC上10 5到106每ML,是1个很高的密度,细胞少了就不太容易养好。 2. 细胞株的来源很重要,如直接来源于ATCC(American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心)生命力要强于国内细胞库的。 3. 注意细胞的密度1定要高,介于5×10^5—— 10^6/mL之间,增值的快。细胞数量太少,不适合THP-1生长,1般状态不好的THP-1在培养了3天后数量仍然不多,继续培养1天或者两天,培养基 严重泛黄,细胞数会增加。这1点不同于同是单核细胞系的U937细胞。 4. THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长,对培养基变化非常敏感,所以 尽量使用相同Ph的1640。 5. 传代后切忌常移出培养箱观察,否则会影响细胞生长,状态变差,1般首先表现为细胞内颗粒变多。1般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3~4天再观察,1般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,1般2-3次换液离心1次(只是补充培养基)3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠2.5g就可以了,宁酸勿碱; 4)注意冻存的时候密度大些,推荐用血清冻存。 6. 复苏比较慢,建议开始用小瓶,不要用1次性的。
3、求助谁有人单核巨噬细胞株U937细胞阿
单核细胞渗出血管,进入组织和器官后,可进1步分化发育成巨噬细胞,成为机体吞噬能力最强的细胞。 巨噬细胞在不同组织中的名称不同:在肺里称“肺巨噬细胞”;在神经系统里称为“小神经胶质细胞”;在骨里则称为“破骨细胞”。 单核-巨噬细胞是对他。 在ERDAS LPS下生成DEM和正射影像步骤 转载自 晨曦 ASTER是1个由1999年发射的EO-1卫星所携带土地调绘传感器。ASTER有14个光谱通道,所覆盖的波谱范围从可见光到热红外(从技术的角度上讲,ASTER包括3个子系统:可见光近红外,短波红外。
4、U937细胞株是什么细胞
U-937细胞是(组织细胞淋巴瘤细胞) 由Sundstrom和Nilsson在1974年建立,取材于患组织细胞淋巴瘤病人的胸水。 皮肤真性组织细胞淋巴瘤(CGHL)又称皮肤组织细胞肉瘤、皮肤真性组织细胞性淋巴瘤。该病与恶性组织细胞增生症极相似,增生的细胞系固定于皮肤组织中的组织细胞,这些细胞具有组织细胞的酶细胞化学、免疫化学及超微结构特征。皮肤真性组织细胞性淋巴瘤系指以皮肤损害为初发或突出表现的真性组织细胞性淋巴瘤。 症状体征 本病十分罕见。所见病例中男女发病相等,年龄自20~86岁不等,其共同点为:
1、皮肤原发性肿瘤,高出皮面,直径约3.5~4cm,表面光滑,呈红、暗红及红黄色,周边可见卫星状小肿瘤或皮下硬性结节,可破溃。
2、晚期有肝、脾及淋巴结肿大,其它内脏亦可受累。病程因受累器官不同而不同。
5、蟾蜍能吃蛇吗
有相关的新闻及视频资料显示体型较大的蟾蜍吃小蛇的报道。 扩展资料:中华大蟾蜍药理作用 1 蟾酥及其制剂的药理作用 对于蟾酥的药理作用,我国古代就有记载。《本草汇言》:“蟾酥,疗疳积,消膨胀,解疗毒之药也。能化解1切瘀郁壅滞诸疾,如积毒、积块、积脓、内疗痈肿之证,有攻毒之功也。”现代药理学研究表明,蟾酥具有强心、抗心肌出血、抗内毒素休克、抗肿瘤等作用。 (1)强心:蟾酥强心作用与洋地黄相似,无蓄积作用。蟾毒配基类和蟾蜍毒素类化合物均有强心作用,前者作用更明显,蟾毒的化学结构与强心有1定的关系。 (2)抗心肌缺血:体外实验表明,蟾酥可增强纤维蛋白溶解酶的纤溶作用,而增加冠状动脉血流量,蟾酥对因血栓形成导致的冠状血管狭窄而引起的心肌梗死等缺血性心脏障碍,能增加心肌营养性血流量,改善微循环,增加心肌供氧。 (3)抗内毒素休克:蟾酥抗内毒素休克可能主要与它具有强心、升压和抑制血小板聚集等作用有关。 (4)抗肿瘤作用:用蟾酥制剂对小鼠肉瘤S18
0、兔BP瘤、子宫颈U1
4、腹水型肝癌等有抑制作用;对人的间皮癌、胃癌、肝癌等肿瘤细胞有抑制作用。蟾蜍皮提取物对小鼠肉瘤S180也有较好抑制生长作用,其抗癌机制与其抑制肿瘤细胞DNA和RNA生物合成及提高机体免疫功能(促进巨噬细胞吞噬作用和增加血清溶菌酶浓度等)有关。蟾酥可以直接抑制小鼠膀胱肿瘤生长,延长小鼠荷瘤生存时间,提高小鼠免疫力可能是蟾酥抗肿瘤生长的重要机制。 (5)其他:还具有提高免疫功能、镇咳、平喘、致幻、抗菌、抗炎、利尿、兴奋呼吸,促进糖原产生和抑制乳酸生成的胰岛素样作用,子宫收缩作用及增强机体对放疗和化疗的耐受力。 2 华蟾素及其注射液的药理作用 华蟾素为中华大蟾蜍皮的水溶性提取物,其注射液是以蟾皮为主要原料研制而成的水溶制剂。现代药理学研究表明华蟾素对麻醉犬正常心脏有类似于洋地黄类药物的负性变时作用和较弱的正性变力作用;体外具有抑制U937细胞株增殖的作用,该作用呈1定的时间-剂量相关性;且能诱导U937细胞株凋亡,其作用可能通过Bc1-
2、c-AMP、Fas、FasL等途径实现;华蟾素在体外还能协同拓扑异构酶Ⅱ抑制剂VP16,诱导急性单核细胞白血病患者原代细胞凋亡。华蟾素注射液对体外培养的H22腹水型肝癌细胞无直接杀伤作用,但能明显抑制其DNA和RNA的生物合成,且抑制作用随药物剂量的增大而增强;华蟾素注射液还具有抗炎、促进免疫功能等作用。
6、h37ra感染thp-1 时间段怎么确定
结核杆菌H37Ra感染RAW264.7巨噬细胞株24 h后收集上清液,用Griess法检测1氧化氮(NO),化学法检测过氧化氢(H2O2)的产生,逆转录~聚合酶链反应(RT~PCR)法检测感染后巨噬细胞IL~12和TNF~αmRNA的表达,ELISA法检测细胞因子IL~12和TNF~α的含量。结果:结核杆菌H37Ra感染巨噬细胞后产生的NO和H2O2水平均显著升高,同时IL~12和TNF~α的分泌和表达也明显增加(P<0.05)。结论:结核杆菌H37Ra感染巨噬细胞后能产生大量的氮氧化物和抗结核细胞因子,从而产生有利于宿主的抗结核免疫应答。 thp1是由人急性单核细胞白血病分离得到的单核细胞系。THP-1细胞特别依赖细胞浓度,ATCC上10 5到106每ML,是1个很高的密度,细胞少了就不太容易养好。 细胞株的来源很重要,如直接来源于ATCC(American Type Culture Collection 美国模式菌种保藏中心)生命力要强于国内细胞库的。 注意细胞的密度1定要高,介于5×105—— 106/ML之间,增值的快。细胞数量太少,不适合THP-1生长,1般状态不好的THP-1在培养了3天后数量仍然不多,继续培养1天或者两天,培养基 严重泛黄,细胞数会增加。这1点不同于同是单核细胞系的U937细胞。 THP-1细胞适合在细胞Ph环境偏酸性环境生长,对培养基变化非常敏感,所以 尽量使用相同Ph的1640。 传代后切忌常移出培养箱观察,否则会影响细胞生长,状态变差,1般首先表现为细胞内颗粒变多。1般THP-1 生长相当快,对于状态已经不好的情况,建议传代后3~4天再观察,1般4天时间培养基已明显泛黄,细胞数量巨增;1)THP-1细胞喜欢酸性条件,你不要老是换培养基。越酸的条件,细胞密度越大,细胞就长得越好;2)不要频繁换液,1般2-3次换液离心1次(只是补充培养基);3) 使用1640(ATCC推荐),注意加碳酸氢钠2.5g就可以了,宁酸勿碱; 4)注意冻存的时候密度大些,推荐用血清冻存。 供参考。