最近要做RNA干扰实验 需要用到显微注射仪,但是这个通氮气的仪器我不会使用,希望大家能帮忙解答。,生物显微注射仪
1、最近要做RNA干扰实验 需要用到显微注射仪,但是这个通氮气的仪器我不会使用,希望大家能帮忙解答。
siRNA表达载体构建好后,即可进行RNA干扰主体实验。RNA干扰主体实验的重点在于: 按照nature的标准,1个专严格的属RNAi介导knockdown实验要有6个对照:⒈转染试剂对照(监控转染及培养条件对结果的影响)。
2、生物显微注射仪
用毛细管烧热了拉开就行了 有卖这种仪器的。
3、植物基因转化的显微注射法是怎样做的?
显微注射法(microinjection)是利用显微注射仪将外源基因直接注入到已固定的植物细胞的细胞核或细胞质中,从而实现基因转移。受体细胞最初仅用原生质体,现在已发展成为适用于带壁的悬浮细胞、花粉粒、卵细胞、子房等。显微注射中1个重要环节是固定受体细胞。动物细胞培养时因为有独特的贴壁生长特征,因而无需进行人工固定,但是,植物细胞在使用显微注射时,必须首先将受体细胞进行人工固定。目前人工固定的方法主要有3种:
1、琼脂糖包埋法,即把低熔点的琼脂糖熔化,冷却到1定温度后将制备的细胞悬浮液混合于琼脂糖中,并使细胞体的1半埋在琼脂糖中而固定,1半暴露在琼脂糖的表面以便于进行显微注射;
2、多聚-L-赖氨酸粘连法,即先用多聚-L-赖氨酸处理玻片表面,由于多聚-L-赖氨酸对细胞有粘连作用,因此当分离的细胞或原生质体与玻片接触时,就可被固定在玻片上;
3、吸管支持法,即用1固定的毛细管将原生质体或细胞吸附在管口,起到固定作用,并且吸管可以旋转或移动位置,使操作者选择最佳位置进行注射。显微注射用的微针通常用拉针机制备,针尖直径以0.5μm左右为宜,1次注入的DNA量约为10superscript-9superscriptmol。显微注射法突出的优点是转化率高,整个操作过程对受体细胞无药物毒害,有利于转化细胞的生长发育,其缺点是操作繁琐耗时,工作效率低,并需精细的操作技术和精密的仪器设备。
4、植物基因转化的显微注射法是怎样做的?
显微注射法(microinjection)是利用显微注射仪将外源基因直接注入到已固定的植物细胞的细胞核或细胞质中,从而实现基因转移。受体细胞最初仅用原生质体,现在已发展成为适用于带壁的悬浮细胞、花粉粒、卵细胞、子房等。显微注射中1个重要环节是固定受体细胞。动物细胞培养时因为有独特的贴壁生长特征,因而无需进行人脊誉丛工固定,但是,植物细胞在使用显微注射时,必须首先将受体细胞进行人工固定。目前人工固定的方法主要有3种:
1、琼脂糖包埋法,即把低熔点的琼脂糖熔化,冷却到1定温度后将制备的虚卜细胞悬浮液混合于琼脂糖中,并使细胞体的1半埋在琼脂糖中而固定,1半暴露在琼脂糖的表面以便于进行显微注射;
2、多聚-L-赖氨酸粘连法,即先用多聚-L-赖氨酸处理玻片表面,由于多聚-L-赖氨酸对细胞有粘连作用,因此当分离的细胞或原生质体与玻片接触时,就可被固定在玻片上;
3、吸管支持法,即用1固定的毛细管将原生质体或细胞吸附在管口,起到固定作用,并且吸管樱樱可以旋转或移动位置,使操作者选择最佳位置进行注射。显微注射用的微针通常用拉针机制备,针尖直径以0.5μm左右为宜,1次注入的DNA量约为10superscript-9superscriptmol。显微注射法突出的优点是转化率高,整个操作过程对受体细胞无药物毒害,有利于转化细胞的生长发育,其缺点是操作繁琐耗时,工作效率低,并需精细的操作技术和精密的仪器设备。
5、显微注射
显微注射就是借助光学显微镜的放大作用,利用显微操作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细胞中,然后生产动物个体的技术。
6、通过显微注射仪将外源基因直接注射到受精卵的雌原核内,使外源基因整合到DNA中,发育成转基因动物。()
参考答案:错误 。