细胞蛋白质提取液(PBS，PMSF，蛋白酶抑制剂)各需要加多少呢?磷酸化蛋白已有RIRA裂解液，PMSF，还需要加什么试剂？磷酸化蛋白酶抑制剂有成品吗？

1、细胞蛋白质提取液(PBS，PMSF，蛋白酶抑制剂)各需要加多少呢?

6孔板加150-250ul裂解液歼绝（含1mM PMSF），PMSF是蛋白酶抑制剂，与裂则改升孙老解液配比1:100。

2、磷酸化蛋白已有RIRA裂解液，PMSF，还需要加什么试剂？磷酸化蛋白酶抑制剂有成品吗？

要加蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂。应该都有成品的，可以问问碧云天。

3、细胞蛋白质提取液(PBS，PMSF，蛋白酶抑制剂)各需要加多少呢?

6孔板加150-250ul裂解液歼绝（含1mM PMSF），PMSF是蛋白酶抑制剂，与裂则改升孙老解液配比1:100。

4、细胞蛋白质提取液（PBS，PMSF，蛋白酶抑制剂）各需要加多少呢？

6孔板加150-250ul裂解液（含1mM PMSF），PMSF是蛋白酶抑制剂，与裂解液配比1:100。

5、镍柱纯化蛋白为什么加pmsf和dtt

加PMSF是因为PMSF是1种蛋白酶抑制剂，可以有效的抑制菌体裂解后的释放出的丝氨酸蛋白酶和巯基蛋白酶的活性。防止它们降解消化目标蛋白。需注意PMSF溶解于水溶液后自身会迅速降解，大约1小时会自身降解完毕即失去作用。需要每1小时补加1些新鲜的PMSF。加DTT是因为DTT是1种还原剂，可以打开蛋白质的2硫键，阻止蛋白质中的半胱氨酸之间所形成的蛋白质分子内或分子间2硫键。避免His-tag被包裹在蛋白结构的内部导致目标蛋白不能结合镍柱。需注意DTT会还原镍柱上的镍离子，可能会造成镍离子的脱落而影响柱效。

6、细胞蛋白质提取液(PBS，PMSF，蛋白酶抑制剂)各需要加多少呢？

6孔板加150-250ul裂解液(含1mMPMSF)，PMSF是蛋白酶抑制剂，与裂解液配比1:100。